產(chǎn)品描述:Taq DNA ligase可催化雙鏈DNA中相鄰的5'-磷酸基和3'-羥基形成磷酸二酯鍵。NAD+是這個(gè)酶的輔助因子。
來(lái)源:重組大腸桿菌
規格:40U/μL
活性單位定義:1 單位指在50 μL反應體系中,45℃ 反應條件下,15分鐘能使 50% 的12 bp粘性末端片段發(fā)生連接所需要的酶量。12 bp粘性末端來(lái)自于經(jīng)1 μg BstEII消化后的λDNA。
酶存儲緩沖液:10mM Tris-HCl (pH7.5, 25℃), 50mM KCl, 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 0.1% Triton X-100 and 50% (v/v)Glyercol.
配套溶液:10X Taq DNA Ligase Reaction Buffer, Cat#ON-72, 200mM Tris-HCl pH7.6, 25℃, 250mM KAC, 100mM Mg(AC)2, 10mM NAD+, 0.1% Triton X-100.
相關(guān)產(chǎn)品推薦:
pfu DNA polymerase, Cat#ON-051
注:該酶需NAD+作為輔助因子,在10×Taq DNA Ligase Reaction Buffer中已添加NAD+,為了延長(cháng)NAD+的半衰期,應保存于-70℃.該酶在45℃-65℃范圍內均有活性。
推薦的操作步驟:
1. 準備一個(gè)無(wú)污染的PCR管,按照下表加入試劑:
Component | Amount |
Nuclease-free H2O | to 50μL |
DNA | up to 1μg of DNA |
10×Taq DNA ligase reaction buffer | 5μL |
Taq DNA ligase | 2μL (80 units) |
2. 45°C反應 15 min.
儲藏溫度:-20℃
質(zhì)控檢測:無(wú)DNase、Nickase污染
純度:SDS-PAGE純度:大于95%
1. Barany F. Proc Nat Acad Sci USA. 88, 189–193 (1991).
2. Gail Lauer, Edwin A. Rudd, Dianel L. Mckay, et al. Journal Of Bacteriology. 173, 5047-5053(1991).