產(chǎn)品描述:Taq DNA polymerase是一種熱穩定的DNA聚合酶,其分子量為94kD。除了5'→3'聚合酶活性外,Taq DNA polymerase還具有 5'→3'外切酶活性和PCR產(chǎn)物3'端加A的脫氧核苷轉移酶活性。
來(lái)源:重組大腸桿菌
規格:5U/μL
活性單位定義:1單位活性定義為74℃,30分鐘內,摻入10nmoles的dNTP到酸性不溶物質(zhì)所需的酶量。
酶存儲緩沖液:20mM Tris-HCl (pH7.9, 25℃), 0.1mM EDTA, 100mM KCl, 0.5% Tween20, 0.5% NP40, 1mM DTT, 50%(v/v) Glycerol
配套溶液:10X Reaction Buffer, Cat#ON-012, 100mM Tris-HCl, 500mM KCl, pH9.0, 25℃; 100mM MgCl2, Cat#ON-013.
相關(guān)產(chǎn)品推薦:
Uracil-DNA Glycosylase (UNG), heat-labile, Cat#ON-054
Uracil-DNA Glycosylase(UNG), E.coli, Cat#ON-056
1. 建議反應體系:
終體積 | 終濃度 | |
10X Reaction buffer | 5μL | 1X |
dNTP Mix, 10mM each | 1 | 0.2mM each |
25mM MgCl2 | 3 | 1.5mM |
上游引物 | X μL | 0.1-1.0μM |
下游引物 | Y μL | 0.1-1.0μM |
Taq (5U/μl) | 0.25μL | 1.25U |
模板DNA | Z μL | <0.5μg/50μL |
Nuclease-Free H2O | to 50μL |
2. 建議反應條件:
循環(huán) | 時(shí)間 | 溫度℃ | |
起始變性 | 1 | 2min | 95 |
變性 | 0.5-1min | 94 | |
退火 | 25-40 | 0.5-1min | Tm-5 |
延伸 | 1min/kb | 72 | |
最終延伸 | 1 | 5min | 72 |
最佳反應濃度:0.5U-5U per 50μL反應體積 (對于50ul反應體積:推薦1.25U)
最佳MgCl2濃度:1.5mM (1~5mM)
儲藏溫度:-20℃
質(zhì)控檢測:無(wú)DNase、Nickase、RNase污染、無(wú)16s rDNA污染
純度:SDS-PAGE純度:大于95%
1. Lawyer FC,et al. PCR Methods Appl. 2(4):275-87(1993).
2. Chien A, Edgar DB, Trela JM.J. Bacteriol 127(3):1550-7(1976).