產(chǎn)品描述：pfu DNA polymerase是一種熱穩定的DNA聚合酶，其分子量為90kD。具有5'-3'DNA聚合酶活性和3'-5'外切酶活性，能糾正DNA擴增過(guò)程中產(chǎn)生的堿基錯配。pfu DNA polymerase相比于Taq DNA Polymerase出錯率較低的，其錯誤率僅為1.3x10^-6。其PCR產(chǎn)物為平端，可加A處理再與TA載體連接或使用平末端克隆載體。

來(lái)源：重組大腸桿菌

規格：3U/μL

活性單位定義：1單位活性定義為74℃、30分鐘內，摻入10nmoles的dNTPs到酸性不溶物質(zhì)所需的酶量。

酶存儲緩沖液：50mM Tris-HCl （pH8.2, 25℃）, 0.1mM EDTA, 0.1% Tween-20, 0.1% NP-40, 1mM DTT, 50% Glycerol

配套溶液：10X pfu Reaction Buffer, ON-068， 200mM Tris-HCl（pH8.8, 25℃），100mM KCl, 100mM (NH₄)₂SO₄, 20mM MgSO₄, 1%Triton X-100.

相關(guān)產(chǎn)品推薦:

Taq DNA Ligase, Cat#ON-308

T4 DNA Ligase, Cat#ON-157

Taq DNA polymerase, Cat#ON-007

10X pfu Reaction Buffer, Cat#ON-068

1. pfu  DNA polymerase具有3'→5'的外切酶活性, 因此延伸率 (0.5-0.6kb/min) 低于 Taq DNA Polymerase(1kb/min), 延伸時(shí)間取決于擴增產(chǎn)物的長(cháng)度;同時(shí), 由于3'→ 5'的外切酶活性, pfu DNA Polymerase 聚合酶可能會(huì )降解引物, 因此配制反應體系時(shí)最后加入pfu  DNA Polymerase。

2. 在用 pfu DNA Polymerase擴增時(shí), 需要更高的引物純度。底物長(cháng)度應大于 18 bp, Tm 值在55-80℃, 引物濃度在0.1-0.5μM之間, 略高于Taq DNA Polymerase.

3. 對于高GC含量的模板, 變性溫度可提高到 98℃,對 DNA Polymerase活性無(wú)影響。

儲藏溫度：-20℃

質(zhì)控檢測：無(wú)DNase、Nickase、RNase污染

純度：SDS-PAGE純度：大于95%

1. Kelly S. Lundberg, Dan D. Shoemaker, Michael W. W. Adams, et al. Gene 108, 1-6 (1991).