產(chǎn)品描述：mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase是經(jīng)大腸桿菌表達、純化的來(lái)源于牛痘病毒的重組蛋白。能特異性的將SAM中的甲基轉移至RNA Cap0上形成Cap1的結構。Cap1結構的RNA更能有效的翻譯，改善mRNA轉染實(shí)驗中的蛋白表達量。mRNA Cap-2'-O-Methyltransferase需要以m7GpppN Cap 結構的RNA為底物。

來(lái)源：重組大腸桿菌

規格：50U/μL

活性單位定義：1單位酶活定義為37℃，1小時(shí)摻入10 pmols 甲基到80nt Capped 0 RNA所用的酶量。

酶存儲緩沖液：20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM NaCl, 1mM DTT, 0.1%(v/v) Triton X-100, 50%(v/v) glycerol.

配套溶液：10X Capping Buffer, Cat#ON-073, 500mM Tris-HCl, pH8.0, 50mM KCl, 10mM MgCl₂, 10mM DTT; S-adenosylmethionine (SAM),32mM, Cat#ON-074.

相關(guān)產(chǎn)品推薦:

Poly(A) Polymerase, Cat#ON-126

Vaccinia Capping Enzyme, Cat#ON-028

Ribonuclease Inhibitor, Human Placenta, Cat#ON-039

10X Capping Buffer, Cat#ON-073

S-adenosylmethionine (SAM),32mM, Cat#ON-074

1. 反應體系中不能含有EDTA；

2. 如為了RNA的穩定性，而加入核糖核酸酶抑制劑，按手冊中反應體系加入至終濃度為1U/μL即可；

3. 在PH7.0-8.0，SAM不穩定，每次反應前需要新稀釋SAM至2mM

4. 在反應前，應對RNA進(jìn)行熱處理，保證轉錄產(chǎn)物的5'末端二級結構打開(kāi)；對高二級結構的RNA可以提高熱變性條件，如65度20分鐘，或75度10分鐘，或85度5分鐘；

5. Vaccinia Capping Enzyme 和 2'-O-methyltransferase 可以一起反應用于生產(chǎn)Cap1結構的RNA；

6. 對部分已知的含有復雜5'結構的RNA,反應時(shí)間可以延長(cháng)至3小時(shí)。

儲藏溫度：-20℃

質(zhì)控檢測：無(wú)DNase，RNase污染

純度：SDS-PAGE純度：大于95%

1. THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY Vol. 250, No. 24, Issue of December 25, pp. 9322-9329,1975.

2. Kuge, H. et al., (1998) Nucl. Acids Res. 26, 3208.