產(chǎn)品描述: T4 RNA Ligase 1，也稱(chēng)為 T4 Rnl 1，是一種 ATP 依賴(lài)型連接酶，作用的底物范圍很廣，包括 RNA，DNA，oligo RNA，oligo DNA 以及多種核苷酸衍生物。該酶以獨立于模板的方式催化 5'-磷酸與 3'-羥基之間形成磷酸二酯鍵。
規格: 10U/μL
活性單位定義: 一個(gè)單位定義為：在 20μL 反應體系中，37°C 孵育 30 分鐘，將 0.4μg 等摩爾比的兩條 23-mer 單鏈 RNA 寡核苷酸（其中一條是 5'-磷酸化的）進(jìn)行連接，連接 50% 所用的酶量。
酶存儲緩沖液: 10mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 50mM KCl, 1mM DTT, 50%(v/v)glycerol, pH7.5@25°C.
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T4 RNA ligase 1，T4 RNA ligase 2，RNaseR 在環(huán)狀 RNA 酶法合成上的應用：
IVT 反應得到線(xiàn)性 RNA：值得注意的是，此步 IVT 反應，需要摻入一定比例的 GMP，獲得含 GMP 的線(xiàn)性 RNA；
RNA 環(huán)化：通過(guò) T4 RNA 連接酶 1（T4 Rnl 1）或 T4 RNA 連接酶 2（T4 Rnl 2）催化 RNA 末端 5'-磷酸和 3'-羥基的連接，將 RNA 分子內兩端連接產(chǎn)生環(huán)狀 RNA；
去除線(xiàn)性 RNA：RNaseR 能夠去除反應液中的所有線(xiàn)性 RNA 分子，從而得到無(wú)線(xiàn)性 RNA 的環(huán)狀 RNA。
注意：T4 RNA ligase 1 的反應體系中需要加入 ATP，可使用 ATP，100mM Solution，Cat#R1331。
儲存條件: Stored at -20±5℃. Do not store in a frost-free freezer. Always avoid freeze-thaw cycles or exposure to frequent temperaturechanges. These fluctuations can greatly alter product stability.
質(zhì)控檢測:
1. Contaminant Assay: Free of Endonuclease, Exonuclease and RNase activities.
2. Endotoxin Assay: Pass.
3. Physical Purity: >90%.