產(chǎn)品描述: T4 RNA Ligase 2，也稱(chēng)為 T4 Rnl 2，具有分子間和分子內 RNA 連接活性。T4 RNA Ligase 2 連接雙鏈 RNA 缺口的活性比連接單鏈 RNA 缺口的活性更高。該酶可連接相鄰的 5'-磷酸和 3'-羥基。在雙鏈結構中，該酶還可以連接 RNA 的 3'-羥基和 DNA 的 5'–磷酸。
規格: 10U/μL
活性單位定義: 一個(gè)單位定義為：在 20μL 反應體系中，37°C 孵育 30 分鐘，將 0.8μg 等摩爾比的 28-mer 和 18-mer RNA 進(jìn)行連接，連接 50% 所用的酶量。
酶存儲緩沖液: 10mM Tris-HCl, 50mM KCl, 35mM (NH4)2SO4, 0.1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50%(v/v) Glycerol, pH7.5@25℃.
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T4 RNA ligase 1，T4 RNA ligase 2，RNaseR 在環(huán)狀 RNA 酶法合成上的應用：
IVT 反應得到線(xiàn)性 RNA：值得注意的是，此步 IVT 反應，需要摻入一定比例的 GMP，獲得含 GMP 的線(xiàn)性 RNA；
RNA 環(huán)化：通過(guò) T4 RNA 連接酶 1（T4 Rnl 1）或 T4 RNA 連接酶 2（T4 Rnl 2）催化 RNA 末端 5'-磷酸和 3'-羥基的連接，將 RNA 分子內兩端連接產(chǎn)生環(huán)狀 RNA；
去除線(xiàn)性 RNA：RNaseR 能夠去除反應液中的所有線(xiàn)性 RNA 分子，從而得到無(wú)線(xiàn)性 RNA 的環(huán)狀 RNA。
注意：T4 RNA ligase 2 的反應體系中需要加入 ATP，可使用 ATP，100mM Solution，Cat#R1331。
儲藏條件: Stored at -20±5℃. Do not store in a frost-free freezer. Always avoid freeze-thaw cycles or exposure to frequent temperaturechanges. These fluctuations can greatly alter product stability.
質(zhì)控檢測:
1. Contaminant Assay: Free of Endonuclease, Exonuclease and RNase activities.
2. Endotoxin Assay: Pass.
3. Physical Purity: >95% by SDS-PAGE with Coomassie? blue staining.