產(chǎn)品描述:M-MLV Reverse Transcriptase, RNase H Minus是一種以RNA為模板的DNA聚合酶, 無(wú)RNase H活性。在RNase H區域進(jìn)行點(diǎn)突變,增加了酶的熱穩定性,并且和野生型M-MLV Reverse Transcriptase相比,能夠得到更多量的全長(cháng)cDNA。
來(lái)源:重組大腸桿菌
規格:200U/μL
活性單位定義:1單位活性定義為37℃、10分鐘內,摻入1nmole的dNTP到酸性不溶物質(zhì)所需的酶量。
酶存儲緩沖液:20mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃), 0.1mM EDTA, 200mM NaCl, 0.01% NP-40, 1mM DTT and 50% Glycerol.
配套溶液:5×RT Reaction Buffer. Cat#ON-067, 250mM Tris-HCl (pH8.3, 25℃),375mM KCl, 15mM MgCl2, 50mM DTT.
相關(guān)產(chǎn)品推薦:
Ribonuclease Inhibitor, Human Placenta, Cat#ON-039
反應體系:
1. 在合成第一鏈DNA之前,將引物(約0.5μg)與模板(最高2μg)預先加熱70℃ 5min ,冰浴5min。加熱可以打開(kāi)模板中的二級結構,冷卻是阻止二級結構的再次形成。
2. 向已經(jīng)退火的引物/模板添加下述溶液:
M-MLV reverse transcriptase, RNase H minus | 50-200U |
5×RT Reaction Buffer | 5μL |
RNasin | 20U |
dNTP (10mM each) | 1.25μL |
Total | 25μL |
3. 42℃ 反應60min。
儲藏溫度:-20℃
質(zhì)控檢測:無(wú)DNase、Nickase、RNase污染
純度:SDS-PAGE純度:大于95%
1. Yu Chen, Weiguo Xu,Qining Sun, Biotechnol Lett. 31, 1051–1057 (2009).
2. Shufeng Liu, Stephen P. Goff, et al. FEBS Letters. 580, 1497-1501(2006).
3. Monica J. Roth, Naoko Tanese, and Stephen P. Goff, The Journal Of Biological Chemistry. 260, 9326-9335(1985).